Le liquide doit bien pénétrer dans les aiguilles: utiliser une seringue pour aspirer et recracher le liquide. Laisser agir au moins 20 minutes (de préférence 1 heure ou toute la nuit). Rincer de la même manière, avec une seringue propre. Désinfection des plaies: liqueur de Dakin: Solution à environ 2° chl ou 0, 63%. La concentration de la liqueur de Dakin en fait un excellent antiseptique, peu agressif pour les plaies. Pour 1, 893° chl mettre un grand verre (250 ml) dans 5 grands verres d'eau (dilution au 1. 6°). Pour la production Wata, on peut l'utiliser tel quel. Il faut laisser agir 20 mn (immerger ou utiliser des compresses imbibées). Renouveler plusieurs fois (ou agiter le bain pendant l'immersion) pour pallier à la dégradation de l'hypochlorite par les matières organiques. Traitement de l'eau de boisson: Solution à 0, 00047° chl ou 0, 00015% ou 0, 0015 g/l ou 1, 5 mg/l. La concentration efficace pour une eau propre est de 1, 5 mg/l (0, 0015 g/l) et le taux résiduel de chlore avant boisson doit être de 0, 5 à 1 mg/l (laisser l'eau traitée avec 1, 5 mg/l pendant 24 h au soleil, dans un sceau protégé des souillures par un linge propre fixé par un élastique, pour permettre l'évaporation du chlore).
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Contexte préalable Une dilution au 1/10 ème de la boisson protéinée a été réalisée et une première série de mesure montre que cette dilution n'est pas suffisante: les valeurs d'absorbance mesurées sont au-dessus du point le plus haut de la gamme d'étalonnage. Une seconde dilution doit être réalisée. Calculer V PE BP10, le volume à prélever de boisson protéinée déjà diluée au 1/10 ème, pour préparer 10 mL d'une solution diluée au 1/20 ème notée BP20. Dosage des proteines par la methode du biuret pdf. Préciser la verrerie nécessaire pour réaliser cette dilution. Après avoir lu la partie « Réalisation pratique », répondre aux questions suivantes: Indiquer le rôle du tube 0 de la gamme d'étalonnage et justifier sa composition. Justifier le choix de la longueur d'onde de travail: 540 nm. Réaliser une analyse a priori des risques liés à l'activité expérimentale: identifier un danger, une voie d'exposition et une situation exposant au danger. Proposer si nécessaire la (les) mesure(s) de prévention adaptée(s) Principe du dosage des protéines par la méthode du biuret Cette méthode consiste à doser la quantité de liaisons peptidiques.
2+, liaisons peptidiques avec les ions Cu c'est pourquoi la méthode a été appelée méthode du biuret. ) b) Qualités de la méthode Méthode de mise en œuvre très simple et très peu onéreuse. La méthode possède une sensibilité influencée par la nature (composition en aminoacides) des protéines à doser: il y a par exemple un effet proline, hydroxyproline et cystéine réel!. La méthode est malheureusement peu sensible. Elle n'est applicable qu'à des milieux très concentrés en protéines (plus de 0, 8 mg/mL). C'est justement le cas du plasma sanguin! Dosage des protéines. D'où son utilisation en analyses médicales. De très nombreuses substances portant des fonctions amines ou amides interfèrent avec la réaction de dosage (voir la littérature spécialisée). Cependant les interférents sériques sont négligeables, d'où l'utilisation en analyses médicales. c) Modes opératoires Le mode opératoire type est le suivant: - Echantillon à doser ou étalon qsp 1 mL avec une solution de NaCl à 9 g/L. 0, 8 à 10 mg de protéines par tube.
Bien homogénéiser. -Attendre 30 minutes à l'obscurité ( è préparation du tableur et réponse aux Q6 à) -Transférer en cuve de mesure avec une pipette compte-gouttes. Parafilmer. -Mesurer les absorbances de chaque solution à 540 nm contre le blanc réactif. -Relever les valeurs mesurées. Limites de la méthode Il faut au minimum 3 ou 4 liaisons peptidiques pour que le complexe protéine-Cu 2+ donne une coloration détectable. La réaction est peu sensible (la concentration en protéine doit être suffisamment élevée) La loi de Beer-Lambert est respectée pour ρ (protéine; solution) < 10 g. Dosage des protéines. L -1. En milieu alcalin, certains composés chimiques comme les glucides réducteurs sont capables de réduire les ions cuivriques en ions cuivreux. Cette méthode ne permet donc par de doser les protéines dans des échantillons complexes tels que le lait. Indication de mesures relevées au spectrophotomètre tube Absorbance à 540 nm 0, 102 0, 192 0, 282 0, 372 0, 462 0, 308 0, 314 Exploitation Justifier la concentration en protéines dans le tube 1 de la gamme (tableau ci-dessous) en citant la loi mise en œuvre et en rédigeant l'équation aux grandeurs, l'équation aux unités et l'équation aux valeurs numériques.
Donnée: écart-type de reproductibilité s r concentration en protéine = 0, 6 g. L -1 En déduire la concentration en protéines dans la boisson protéinée non diluée. Méthode de bradford avantages et inconvénients. Calculer l'intervalle d'acceptabilité: la boisson protéinée sera supposée conforme si l'écart entre la valeur trouvée et la valeur présente sur l'étiquette est inférieure à 10% Donnée: la concentration théorique est de 130 g de protéines par litre. Comparer la valeur retenue avec les données du fournisseur et indiquer si la valeur mesurée est conforme à la valeur fournie par le fabricant. [1] Si les deux valeurs mesurées ne sont pas compatibles, indiquer clairement la démarche qu'il faudrait suivre ET poursuivre les calculs sur une des deux valeurs au choix.
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